Élution -Elution

Colonne de chromatographie

En chimie analytique et organique , l' élution est le processus d'extraction d'un matériau d'un autre par lavage avec un solvant ; comme dans le lavage des résines échangeuses d'ions chargées pour éliminer les ions capturés.

Dans une expérience de chromatographie liquide , par exemple, un analyte est généralement adsorbé, ou "lié à", un adsorbant dans une colonne de chromatographie liquide. L'adsorbant, une phase solide (phase stationnaire), est une poudre qui est enrobée sur un support solide. Basé sur la composition d'un adsorbant, il peut avoir des affinités variablespour "s'accrocher" à d'autres molécules - formant un film mince à la surface de ses particules. L'élution est alors le processus d'élimination des analytes de l'adsorbant en faisant passer un solvant, appelé "éluant", devant le complexe adsorbant/analyte. Au fur et à mesure que les molécules de solvant « éluent » ou descendent dans la colonne de chromatographie, elles peuvent soit passer par le complexe adsorbant/analyte, soit déplacer l'analyte en se liant à l'adsorbant à sa place. Une fois que les molécules de solvant ont déplacé l'analyte, l'analyte peut être transporté hors de la colonne pour analyse. C'est pourquoi, lorsque la phase mobile sort de la colonne, elle s'écoule généralement dans un détecteur ou est collectée pour une analyse de composition.

Prédire et contrôler l'ordre d'élution est un aspect clé des méthodes chromatographiques sur colonne.

Série éluotropique

Une série éluotropique est une liste de divers composés par ordre de pouvoir éluant pour un adsorbant donné . Le "pouvoir éluant" d'un solvant est en grande partie une mesure de la capacité du solvant à "extraire" un analyte de l'adsorbant auquel il est attaché. Cela se produit souvent lorsque l'éluant s'adsorbe sur la phase stationnaire, déplaçant l'analyte. Ces séries sont utiles pour déterminer les solvants nécessaires pour la chromatographie de composés chimiques. Normalement, une telle série progresse des solvants non polaires, tels que le n-hexane , aux solvants polaires tels que le méthanol ou l'eau . L'ordre des solvants dans une série éluotropique dépend à la fois de la phase stationnaire et du composé utilisé pour déterminer l'ordre.

Force d'adsorption (le moins fortement adsorbé → le plus fortement adsorbé)
Hydrocarbures saturés; halogénures d'alkyle Hydrocarbures insaturés; halogénures d'alcényle Hydrocarbures aromatiques; halogénures d'aryle Hydrocarbures polyhalogénés Éthers Esters Aldéhydes et cétones Alcools Acides et bases (amines)
Pouvoir d'élution (plus petit pouvoir d'élution → plus grand pouvoir d'élution)
Hexane ou pentane Cyclohexane Benzène Dichlorométhane Chloroforme Éther (anhydre) Acétate d'éthyle (anhydre) Acétone (anhydre) Méthanol Éthanol Pyridine Acide acétique Eau

Eluant

L' éluant ou éluant est la partie « porteuse » de la phase mobile. Il déplace les analytes à travers le chromatographe . En chromatographie liquide , l'éluant est le solvant liquide ; en chromatographie en phase gazeuse , c'est le gaz vecteur.

Eluer

L' éluat est le matériau analyte qui émerge du chromatographe . Il comprend spécifiquement à la fois les analytes et les solutés traversant la colonne, tandis que l'éluant n'est que le support.

Temps d'élution et volume d'élution

Le " temps d'élution" d'un soluté est le temps entre le début de la séparation (le moment où le soluté entre dans la colonne) et le moment où le soluté s'élue. De la même manière, le volume d' élution est le volume d'éluant nécessaire pour provoquer l'élution. Dans des conditions standard pour un mélange connu de solutés dans une certaine technique, le volume d'élution peut être une information suffisante pour identifier les solutés. Par exemple, un mélange d' acides aminés peut être séparé par chromatographie échangeuse d'ions . Dans un ensemble particulier de conditions, les acides aminés élueront dans le même ordre et au même volume d'élution.

Élution d'anticorps

L'élution d'anticorps est le processus d'élimination des anticorps qui sont attachés à leurs cibles, telles que la surface des globules rouges . Les techniques comprennent l'utilisation de la chaleur, des ultrasons, des acides ou des solvants organiques. Aucune méthode n'est la meilleure dans toutes les situations.

Voir également

Références

Liens externes